В рамках выполнения проекта впервые с использованием системы CRISPR/Cas9 получена стабильная культура индивидуальных фибробластов с нокаутом гена β-лактоглобулина (BGL) для их дальнейшего использования в качестве кариопластов при получении клонированных эмбрионов крупного рогатого скота. Эффективность редактирования (инактивация генов PAEP и LOC100848610) составила примерно 4%. Кроме того, изучено влияние трех клеточных цитокинов фактора роста фибробластов 2 (FGF2), инсулиноподобного фактора роста (IGF-1) и фактора, ингибирующего лейкемию (LIF) в период созревания ооцитов in vitro на цитологические и молекулярные изменения яйцеклеток, связанные с жизнеспособностью женских гамет и их компетенцией к эмбриональному развитию. Показано, что культивирование ооцитов при воздействии LIF, IGF-1 и bFGF обусловливает необходимый уровень ядерного созревания в ооцитах, уменьшает частоту хромосомных аномалий в созревших яйцеклетках, увеличивает экспрессию антиапоптотического гена BCL-2, а также повышает компетенции искусственно активированных яйцеклеток к развитию до стадии бластоцисты. Полученные результаты позволили сделать вывод о целесообразности применения система созревания ооцитов коров, содержащей LIF, IGF-1 и bFGF для повышения эффективности получения клонированных эмбрионов крупного рогатого скота, в том числе и с использованием трансфецированных соматических клеток.
